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流式細胞計的技術參數

為了表征儀器性能,往往根據使用目的和要求而提出幾個技術參數或指標來定量說明。對于流式細胞計常用的技術指標有熒光分辨率、熒光靈敏度、適用樣品濃度、分選純度、可分析測量參數等。   (1)熒光分辨率:強度一定的熒光

為了表征儀器性能,往往根據使用目的和要求而提出幾個技術參數或指標來定量說明。對于流式細胞計常用的技術指標有熒光分辨率、熒光靈敏度、適用樣品濃度、分選純度、可分析測量參數等。

  (1)熒光分辨率:強度一定的熒光在測量時是在一定道址上的一個正態分布的峰,熒光分辨率是指兩相鄰的峰可分辨的最小間隔。通常用變異系數(C.V值)來表示。C.V的定義式為:

  C.V=σ/μ

  式中,σ為標準偏差,μ是平均值。

  在實際應用中,我們使用挖關系式σ=0.423FWHM;其中FWHM為峰在峰高一半處的峰寬值。目前儀器的熒光分辨率均優于2.0%。

  (2)熒光靈敏度:反映儀器所能探測的最小熒光光強的大小。一般用熒光微球上所標可測出的FITC(fluorescein isothiocyanate 異硫氰基熒光素)的最少分子數來表示。目前儀器均可達到1000左右。

  (3)分析速度/分選速度:儀器每秒種可分析/分選的數目。一般分析速度為5000~10000;分選速度掌握在1000以下。

  (4)樣品濃度:主要給出儀器工作時樣品濃度的適用范圍。一般在105~107細胞/ml的數量級。

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